IMMUTREP VDRL Antigen

Ref

OD011

Serodiagnose von Syphilis mittels Objekttäger - oder Röhrchen-Flockulationstest. Bei Raumtemperatur lagern. NICHT EINFRIEREN. Nur zur Verwendung für In-vitro-Diagnostik. EINLEITUNG UND VORGESEHENE VERWENDUNG IMMUTREP VDRL dient zur Verwendung beim nichttreponemalen Flockulationstest zur qualitativen und semi-quantitativen Bestimmung von Reaginantikörpern im Serum. Nur zum professionellen Gebrauch.

angegeben ist. Reagenzien nach dem Ablaufdatum nicht mehr verwenden. Es sollte vermieden werden, die Reagentien übermäßigen Temperaturen auszusetzen. Nicht direktem Sonnenlicht aussetzen. KEINES DER REAGENZIEN EINFRIEREN da dies irreversiblen Schaden verursacht.

TESTPRINZIP IMMUTREP VDRL Antigen ist ein nicht-treponemales Antigen, das nicht-treponemale Antikörper (Reagin) detektiert, die mit einer Syphilisinfektion assoziiert sind. Wenn das Antigen der VLDR gepufferten Kochsalzlösung zugefügt wird, bildet sich eine Emulsion mit sehr feinen Partikeln. In der Anwesenheit von Reagin flocken diese Partikel aus, und erzeugen ein Testresultat das unter dem Mikroskop sichtbar ist. Das Fehlen von Ausflockung lässt ein negatives Ergebnis erkennen. Dieser Test wurde kalibriert mit dem WHO-ReferenzSerum für Serodiagnostik-Tests für treponemale Infektionen – REF 3-1980. INHALT

PROBENSAMMLUNG UND VORBEREITUNG Dem Patienten eine Probe venösen Blutes entnehmen, Gerinnselbildung und Zusammenziehen ermöglichen. Geronnene Blutprobe zentrifugieren und klares Serum entnehmen. Es werden frische Serumproben benötigt. Keine hämolysierten, kontaminierten oder lipämischen Proben zur Testung verwenden, da dies die Ergebnisse nachteilig beeinflusst.

Ref OD011

VDRL

Die Antigenflasche muss nach Entnahme eines Aliquots des Antigens dicht verschlossen werden. Keine feuchte Pipette in das Antigen einbringen, da das Antigen präzipitieren würde. Wenn in der Antigenlösung Kristalle sichtbar werden können diese durch sanfte Erwärmung des Produktes auf 50°C wieder aufgelöst werden.

Ag

Das Serum kann bei 2°C bis 8°C für bis zu 48 Stunden vor der Testung gelagert werden. Wenn eine längere Lagerung notwendig ist, bei -20°C bis zu 6 Wochen lagern. Aufgetaute Proben müssen vor der Testung gemischt werden. Die Proben nicht wiederholt einfrieren und auftauen, da dies falsche Ergebnisse bedingt.

Suspension aus 0.03% Cardiolipin, 0.2% Lecithin und 0.9% Cholesterin. Arbeitskonzentration. Soln Saline 60ml Gepufferte Kochsalzlösung. Arbeitskonzentration. Gebrauchsanweisung

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BENÖTIGTE, NICHT BEREITGESTELLTE MATERIALIEN Glasring-Objektträger Schüttler Glasröhrchen 12 x 75mm Mikropipetten: 22µl, 50µl und 1000µl Isotone Kochsalzlösung: 0,9% NaCl VORSICHTSMAßNAHMEN IMMUTREP VDRL Reagenzien enthalten keine gefährlichen Substanzen gemäß Definition der gültigen UK-Chemikalienverordnungen (Gefahreninformation und Lieferverpackung). Alle Reagenzien sollen dennoch als potentielle Biogefahren bei Verwendung und Entsorgung behandelt werden. Die endgültige Entsorgung muss der lokalen Gesetzgebung entsprechen. Nicht einnehmen. IMMUTREP VDRL Reagenzien enthalten 0,095% Natriumazid als Konservierungsmittel welches bei Einnahme toxisch sein kann. Natriumazid kann mit Blei und Kupferrohren unter Bildung hochexplosiver Salze reagieren. Bei der Entsorgung mit großen Wassermengen spülen. LAGERUNG Reagenzien bei Raumtemperatur (20°C bis 25°C) lagern. Der Kit funktioniert gemäß Spezifizierung bis zum angegebenen Ablaufdatum wie vom Produktionsdatum bestimmt und am Kit und den Komponenten angegeben. Das Ablaufdatum ist der letzte Tag des Monats der auf der Flasche und der Kit-Etikette

Das Serum muss durch Erhitzen auf 56°C für 30 Minuten inaktiviert werden. Wenn zwischen Erhitzung und Testung mehr als 4 Stunden liegen sollte das Serum nochmals inaktiviert werden. Liquor cerebrospinalis kann für diesen Test verwendet werden, benötigt aber keine Inaktivierung. DIE TESTSERA VOR VERWENDUNG IM QUALITATIVEN TEST NICHT VERDÜNNEN. REAGENZIENVORBEREITUNG: Alle Reagenzien sollen vor Gebrauch auf Raumtemperatur (20°C bis 25°C) gebracht und behutsam gemischt werden. Kein Schäumen verursachen. Objektträgertest – 0.4ml gepufferte Kochsalzlösung in eine flachbödige Flasche pipettieren. Danach 0.5ml VDRL Antigen (unter Verwendung einer sauberen Pipette) tropfenweise der Kochsalzlösung zufügen über einen Zeitraum von 6 Sekunden während die Flasche auf einer flachen Oberfläche rotiert. Die Rotation weitere 10 Sekunden fortsetzen und danach 4.1ml gepufferte Kochsalzlösung zufügen. Das vorbereitete Antigen ist nun fertig zur Verwendung und muss innerhalb von 24 Stunden verwendet werden, wenn es bei 2°C bis 8 °C gelagert wird. Röhrchentest – ein Volumen der VDRL Antigenemulsion wie für den Objektträgertest vorbereitet verwenden. Danach 4 Volumen von der 0.9% Natriumchloridlösung zusetzen, kräftig mischen und vor Gebrauch mindestens 5 Minuten stehen lassen. Nach 2 Stunden nicht mehr verwenden.

VERWENDUNGSEINSCHRÄNKUNGEN

FINDEN UND BESEITIGEN VON STÖRUNGEN ODER PROBLEMEN

Die Verwendung anderer Proben als Serum oder Liquor cerebrospinalis wurde in diesem Test nicht validiert.

Für jede Probe eine eigene Einwegspitze verwenden um Kreuzkontamination zu vermeiden.

Es gibt kein Wiederverwendungsprotokoll für dieses Produkt.

Alle Reagenzien sofort nach Verwendung wieder verschließen.

Ein schwaches oder verdächtig positives Resultat sollte nochmals beurteilt werden. Die Diagnose sollte nicht nur auf Basis von Beobachtungen eines klinischen Tests gestellt werden. Es wird dringend angeraten bei der Interpretation des Tests alle klinischen Daten miteinzubeziehen.

Vor Beginn der Analyse alle Reagenzien auf Raumtemperatur bringen (20°C bis 25°C). Alle Reagenzien behutsam mischen durch vorsichtiges Umdrehen oder Umherwirbeln.

Falsch positive Ergebnisse können mit VDRL Antigen auftreten wenn der Patient eine andere Infektion als Syphilis hat. Wenn ein positives VDRL Resultat auftritt, sollte ein spezifischer Treponematest durchgeführt werden. OMEGA erzeugt und liefert IMMUTREP TPHA zur Detektion von spezifischen Anti-treponemalen Antikörpern. TESTPROZEDUR

Zur Verwendung durch Personen mit zumindest einem Minimum an grundlegender Laborpraxis. Beschädigte oder kontaminierte Komponenten des Kits nicht verwenden. EVALUIERUNGSDATEN Die Reproduzierbarkeit von IMMUTREP VDRL ist 100% (+/- eine doppelte Verdünnung).

Qualitative Methode 1. 50l inaktiviertes Serum auf Ringobjektträger auftragen. 2. 22l geschütteltes Antigen der Probe zufügen. (Die zwei Komponenten müssen nicht gemischt werden.) 3. Objektträger 4 Minuten bei 180 rpm rotieren. 4. Unmittelbar nach den 4 Minuten das Resultat mikroskopisch bei 100x Vergrößerung begutachten. Semi-quantitative Methode 1. Unter Verwendung isotoner Kochsalzlösung Serienverdünnungen des inaktivierten Patientenserums herstellen (1/2, 1/4, 1/8, 1/16, 1/32, 1/64 usw.) 2. 50l jeder Serumverdünnung auf einen Testkreis des Objektträgers auftragen. 3. 22l des geschüttelten Antigens der Probe zufügen. (Die zwei Komponenten müssen nicht gemischt werden.) 4. Objektträger/Karte 4 Minuten bei 180 rpm rotieren. 5. Unmittelbar nach den 4 Minuten das Resultat mikroskopisch bei 100x Vergrößerung begutachten. Röhrchen Test 1. 0.5ml der inaktivierten Serumprobe in ein Röhrchen einbringen. 2. 0.5ml des verdünnten Arbeitsantigens zufügen. 3. Das Röhrchen mittels Kahn-Schüttler 5 Minuten schütteln. 4. Das Röhrchen 10 Minuten bei 2000 rpm zentrifugieren. 5. Das Röhrchen 1 Minute schütteln und sofort begutachten.

Unbehandelte Syphilis Behandelte Syphilis Normale Proben

Gesamt

21 31 453 505

Gesamtsensitivität 20/21 + 26/31 = 46/52 = 88.5% Spezifität 448/453 = 98.9% REFERENZEN 1. 2. 3.

Manual of Tests for Syphilis. PHS Publication No.411, U.S. Govt. Printing Office (1969). Harris, A., et. al. J.Ven. Dis. Information 27, 169 (1946). Harris, A., et. al. J.Ven. Dis. Information 29, 72 (1948)

8000A ISSUE 3A Revised January 2015. GERMAN  Omega Diagnostics Ltd 2015.

ERGEBNISSE UND INTERPRETATION Proben mit bekannten Levels sollten bei jedem Test getestet werden. Wenn die Levels der bekannten Proben nicht die erwarteten Ergebnisse zeigen, müssen die Testresultate als ungültig angesehen werden. Qualitative Methode Mittlere und große Aggregate Fein dispergierte Aggregate Keine sichtbaren Aggregate, graues geschmeidiges Erscheinungsbild

IMMUTREP VDRL + 20 1 26 5 5 448 51 454

reaktiv schwach reaktiv nicht reaktiv

Semi-quantitative Methode Der Titer entspricht der letzten Verdünnung mit einem reaktiven Ergebnis. Röhrchentest Aggregation im Röhrchen reaktiv Keine sichtbare Aggregation nicht reaktiv Titer von 1/128 wurden mit IMMUTREP VDRL detektiert ohne Prozone-(Hook-) Effekt.

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